1. 적절한 냉동보존 튜브를 선택하는 방법
1. 재료
우리는 모두 냉동보존 튜브가 주로 조직이나 세포 샘플의 저온 운송 및 보관에 사용되며 생물학 연구 및 의학 분야에서 일반적으로 사용된다는 것을 알고 있습니다. 냉동바이얼은 샘플과 직접 접촉하기 때문에 첫 번째 단계는 재료에 의한 샘플의 오염을 피하기 위해 올바른 재료를 선택하는 것입니다.
일반적으로, 크라이오바이얼은 비세포독성 재료로 만들어집니다. 실험실에서 일반적으로 사용되는 재료로는 플라스틱과 유리가 있습니다. 그러나 유리 크라이오바이얼은 고속 또는 초원심분리기에서 사용할 수 없기 때문에 플라스틱 크라이오바이얼이 사용됩니다. 더 보기.
플라스틱 소재가 너무 많은데, 어떻게 선택해야 할까요?
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폴리프로필렌은 화학적, 온도 안정성이 매우 뛰어나며 액체 질소의 기체 상태에서 영하 187도까지 낮은 온도를 견딜 수 있습니다.
2. 구성
냉동보존 바이알은 일반적으로 캡과 튜브 바디로 구성되며, 내부 나사 캡과 외부 나사 캡 냉동바이알로 나뉩니다. 샘플을 액체 질소의 증기 상태에서 보관하려면 실리카겔 패드가 있는 내부 회전 냉동보존 튜브를 사용하고, 샘플을 냉장고와 같은 기계 장치에 보관하려면 일반적으로 실리카겔 패드가 없는 외부 회전 냉동보존 튜브를 사용합니다.
일반적으로 내부 회전 크라이오바이얼의 저온 저항성은 외부 회전 크라이오바이얼보다 우수합니다. 구체적인 선택은 실제 필요에 따라 이루어져야 합니다.
3. 사양
실험 요구 사항에 따라 일반적으로 크라이오바이얼은 {{0}}.5ml, 1.0ml, 1.5ml, 1.8ml, 2.0ml, 4ml, 5ml, 7ml, 10ml와 같은 사양을 갖습니다.
생물학적 샘플에 일반적으로 사용되는 냉동보관 튜브는 일반적으로 크기가 2ml입니다. 샘플의 부피는 일반적으로 냉동보관 튜브 부피의 2/3를 초과할 수 없으므로 적절한 선택은 냉동 샘플의 크기에 따라 달라야 합니다.
2. 냉동보존 튜브의 사용
크라이오튜브는 혈청, 배양 배지, 세포 및 조직과 같은 다른 시약의 보존 및 극저온 보관에 적합합니다. 세포를 동결하는 데 사용할 수 있을 뿐만 아니라 박테리아 균주를 동결하는 데도 사용할 수 있습니다. 세포와 박테리아 균주를 동결하는 방법은 다릅니다.
1. 냉동보관 세포
세포 냉동보존을 위한 일반 단계:
① 동결보존 용액을 준비합니다. 10%-20%를 함유한 세포 동결보존 용액을 준비합니다. 일반적으로 사용되는 세포 동결보존 용액에는 글리세롤, DMSO, FBS 등이 있습니다. 구체적인 공식은 실험적 필요에 따라 조정할 수 있습니다.
②세포 준비: 세포를 80%-90%의 농도로 배양하고 세포를 수확한 후 PBS나 기타 완충액으로 1-2번 세척하여 세포 파편과 폐기물을 제거합니다.
③세포 현탁액 준비: 적정량의 동결보존 용액을 첨가하고, 세포를 세포 현탁액에 현탁한 후, 동결바이알 또는 기타 동결보존 용기에 고르게 분배합니다.
④완만한 냉각 : 세포 동결보존 튜브나 기타 용기를 넣고 -20도에서 등온으로 서서히 냉각시키면서 세포가 점차 -80도 이하로 식습니다.
⑤급속냉동 : 세포 동결보존 튜브나 기타 용기를 액체질소로 채워진 용기에 넣고 급속냉동시켜 세포를 매우 빠르게 -196도 이하로 냉각시키는 방법입니다.
⑥보관: 세포 냉동바이알이나 기타 용기는 필요할 때 해동하여 회수할 때까지 액체질소에 보관합니다.
2. 냉동보관 균주
박테리아 균주를 동결하는 방법은 여러 가지가 있습니다. 여기서는 냉동보존 튜브를 사용하는 방법만 소개합니다.
도자기 비드 냉동보존 방법
도자기 비드 냉동보존 튜브에는 12개의 서리 도자기 비드와 균주 보존 용액이 들어 있습니다. 대수적 성장기의 균주를 골라 냉동보존 튜브로 옮기고 뒤집어서 섞습니다. 이때 균주는 보존 용액에 고르게 분포됩니다. 피펫을 사용하여 보존 용액을 빨아냅니다. 이때 표면 장력의 작용으로 각 도자기 비드의 표면은 보존 용액 층으로 덮이고 박테리아는 이 보존 용액 층에 보존됩니다. 박테리아가 들어 있는 냉동보존 튜브를 장기 동결을 위해 -80도 냉장고로 옮깁니다(일반적으로 약 1년 동안 보관할 수 있습니다).
균주를 사용해야 할 때는 -80도 냉장고에서 크리오바이얼을 꺼내고, 가볍게 흔들어 도자기 비드를 분산시키고, 도자기 비드를 골라 배양 배지 플레이트에 접종하여 스트리크 배양을 하거나, 액체 배양 배지에 접종합니다. 진탕 배양을 실시했습니다. 접종이 완료되면 크리오바이얼을 재빨리 냉장고에 다시 넣습니다.
글리세린균 보존방법
이 방법은 박테리아 균주의 중장기 보존에 적합하며 보존 기간은 1년 이상일 수 있습니다. 글리세린 자체는 매우 점성이 높고 정량화하기 어렵기 때문에 일반적으로 글리세롤과 생리식염수를 1:1 비율로 제조하여 최종 농도가 50%인 글리세롤 용액을 형성합니다. 사용 시 50% 글리세롤:박테리아 액체=1:1 비율로 혼합하여 최종 글리세롤 농도가 20-30%가 되도록 합니다. 글리세롤 농도가 너무 높거나 낮으면 박테리아 균주 보존에 도움이 되지 않습니다. 장기 보관을 위해 글리세롤 배양액을 -80도 냉장고로 옮깁니다. 균주를 회수해야 할 때는 동결보존 튜브를 37도 수조에 넣어 균주가 완전히 녹을 때까지 빠르게 해동합니다. 이때 균주를 꺼내 실험할 수 있습니다. 이 방법은 도자기 비드가 필요하지 않으므로 일반적인 크라이오바이알로도 충분합니다.
진우 크라이오튜브
재료:
캡과 바디는 고품질 폴리프로필렌 소재로 제작되었습니다.
특징:
*캡과 튜브 본체는 모두 동일한 배치 및 모델의 고품질 폴리프로필렌 소재로 만들어졌으며, 내화학성과 내열성이 우수합니다. 동일한 팽창 계수는 모든 온도에서 양호한 밀봉을 보장합니다.
*자립형 설계로 편리한 관리, 냉동실 공간 효율적 절약
*외부 나사 캡의 투명한 패턴 디자인은 마찰을 증가시키고, 빠른 개폐를 용이하게 하며, 처리된 샘플의 오염 가능성을 줄입니다. 냉동 샘플용으로 특별히 설계되었습니다.
*튜브 벽 바닥의 최적화된 설계로 샘플 제거가 용이하고 잔여물 감소
* 가장 낮은 온도 -196도 셀시우스를 견딜 수 있으며, 튜브 본체가 매우 투명하여 샘플을 쉽게 관찰할 수 있습니다.
*튜브 본체에는 실험 과정을 기록하기 쉽도록 눈금선과 빈 쓰기 영역이 있습니다.
*감마선 조사 살균, DNase/RNase 무첨가, 발열원 무첨가, 엔도톡신 무첨가